24小时不睡觉会对身体多个系统造成不良影响，如导致神经系统功能紊乱、影响心血管系统正常运转、降低免疫系统功能等。
神经系统方面
大脑长时间得不到休息，会出现注意力不集中、记忆力下降、反应迟钝等情况。例如，研究表明，睡眠缺失会使大脑处理信息的效率降低，影响学习和工作能力，对于学生可能导致学业成绩下滑，对于上班族则会降低工作效率，增加出错风险。
心血管系统方面
长期不睡觉会使血压升高、心率加快，增加心血管疾病的发生风险。睡眠不足时，身体会处于应激状态，促使肾上腺素等激素分泌增加，进而影响心血管的正常调节，长期如此可能引发高血压、心律失常等问题，尤其对于本身有心血管基础疾病的人群，危害更为严重。
免疫系统方面
免疫系统功能会受到抑制，人体抵抗力下降，更容易受到病毒、细菌等病原体的侵袭。睡眠是身体修复和增强免疫力的重要时间，缺少睡眠会干扰免疫细胞的正常功能，使人更容易感冒、感染其他疾病，且患病后恢复时间可能延长。
其他方面
还可能出现情绪波动大，如焦虑、抑郁、烦躁等情绪，皮肤状态变差，出现暗沉、长痘痘等情况。对于儿童青少年，长期睡眠不足还可能影响生长发育，因为生长激素在睡眠中分泌旺盛，缺乏睡眠会阻碍生长激素的正常分泌，影响身高和身体机能的发育。