出现咳嗽、发热等呼吸道症状且持续不缓解者；有肺炎相关表现，如胸痛、呼吸困难等人群；免疫力低下者，如患有艾滋病、长期使用免疫抑制剂者；儿童尤其是5岁以下幼儿；老年人；有支原体肺炎家族聚集性发病情况的人群；近期密切接触过支原体肺炎患者者；从事密集型工作，如学生、医护人员等；有基础肺部疾病，如慢性阻塞性肺疾病等的人群，都需要考虑查是否感染支原体。
一、出现呼吸道症状持续不缓解者
当出现长时间咳嗽，尤其是刺激性干咳，或伴有发热等呼吸道症状，且经过一般治疗无明显改善时，需排查支原体感染。因为支原体感染可引起呼吸道炎症，导致长期咳嗽等表现。
二、有肺炎相关表现者
若出现胸痛、呼吸困难等肺炎相关症状，要考虑支原体肺炎的可能，此时需要检查是否感染支原体。支原体肺炎可影响肺部正常结构和功能，引发这些症状。
三、免疫力低下者
像患有艾滋病的患者，由于自身免疫系统被破坏，抵抗力下降；长期使用免疫抑制剂的人群，如接受器官移植后需长期用免疫抑制剂的人，更容易受到支原体感染，这类人群应排查。
四、儿童群体
5岁以下幼儿免疫系统发育尚不完善，相对更容易感染支原体，当幼儿出现呼吸道不适等情况时，需检查是否感染支原体。
五、老年人
老年人身体机能衰退，免疫力降低，感染支原体的风险增加，如有呼吸道异常表现，应考虑排查。
六、有家族聚集性发病情况者
如果家庭或集体生活环境中有多人出现类似支原体感染的症状，那么其他成员也需排查是否感染支原体，因为支原体感染有一定聚集性。
七、密切接触支原体肺炎患者者
与支原体肺炎患者有密切接触的人，被感染的几率较高，需排查是否感染。
八、密集型工作人群
学生在学校集体生活，医护人员接触患者机会多，这类密集型工作人群属于支原体感染的高危人群，需关注并排查。
九、有基础肺部疾病者
本身患有慢性阻塞性肺疾病等基础肺部疾病的人，呼吸道防御能力相对较弱，易感染支原体，出现相关症状时要排查。