三伏贴的穴位是依据所需调理和治疗的病症来选定的，主要包括天突穴、膻中穴、膏肓俞、大椎穴等。
一、天突穴：
三伏贴贴于天突穴能够对咳嗽、咽喉炎、扁桃体炎等病症起到治疗作用。此穴位处在颈部前正中线上，位于两锁骨中间、胸骨上窝中央的位置。
二、膻中穴：
其能使上焦气机通畅，有着疏通经络以及理气散瘀的效用。三伏贴贴在该穴位可缓解咳嗽、气喘、胸闷等状况，对于女性乳腺炎的治疗也有一定助力。膻中穴的位置在胸部前正中线上，平第四肋间，即两乳头连线的中点处。
三、膏肓俞：
膏肓俞位于背部，是在第四胸椎棘突下，旁开三寸，归属于足太阳膀胱经，左右两侧呈对称位置各有一个。将三伏贴贴于该穴位，能够防治各类慢性虚损性疾病。
四、大椎穴：
大椎穴可以振奋人体阳气，常被用于治疗感冒、颈肩疼痛、咳嗽、喘息等病症。其所在位置是颈部下端，第七颈椎棘突下凹陷处。
总之，三伏贴通过贴在不同的穴位来发挥对多种病症的调理和治疗作用。