巨细胞病毒感染主要通过多种途径传播。人群普遍易感，尤其是免疫功能低下者更容易被感染。
母婴传播：
宫内感染： 孕妇感染巨细胞病毒后，病毒可通过胎盘传播给胎儿，大约有10% - 15%的孕妇在孕期感染巨细胞病毒时会发生宫内传播，导致胎儿感染。产道感染： 胎儿在分娩过程中通过产道时，接触到母亲产道中含有巨细胞病毒的分泌物而被感染。
密切接触传播：
唾液传播： 儿童之间在日常密切接触中，比如一起玩耍、共用餐具等，通过唾液交换可能传播巨细胞病毒。例如在幼儿园等集体环境中，儿童之间感染巨细胞病毒的风险相对较高。密切生活接触： 成人之间通过密切的生活接触，如亲吻等，也可能传播巨细胞病毒。另外，照顾感染巨细胞病毒的患儿时，如果没有做好防护措施，也容易被感染。
血液传播：
输血或器官移植： 输入含有巨细胞病毒的血液或者接受了感染巨细胞病毒的器官移植，都可能导致巨细胞病毒感染。比如在一些医疗输血过程中，如果血液筛查不严格，就可能将含有巨细胞病毒的血液输入受血者体内，从而引发感染。在器官移植领域，供体器官如果携带巨细胞病毒，受体接受后也容易被感染。母婴以外的垂直传播： 虽然主要是母婴传播，但对于免疫功能正常的成年人，通过血液途径接触到巨细胞病毒也可能被感染，不过相对母婴传播和密切接触传播，血液传播在一般人群中的发生概率相对低一些，但也是感染途径之一。
性传播：
性接触传播： 巨细胞病毒可通过性接触传播，在性活跃人群中，通过无保护的性行为，如阴道性交、肛交、口交等，病毒可以在性伴侣之间传播。研究表明，在性传播疾病的患者中，巨细胞病毒的感染率可能会升高。