二胎不怀孕时，夫妻双方都需要进行检查。女性一般需要进行妇科超声检查，通过超声可以观察子宫和卵巢的形态、结构等，大概费用在100~300元左右；还需要进行性激素六项检查，一般在月经来潮的第2~5天检查，费用大概200~500元，能了解内分泌情况。另外，输卵管通畅检查也很重要，常见的有输卵管造影，一般在月经干净后3~7天进行，费用约300~800元，可查看输卵管是否通畅。
女性方面检查
妇科超声检查： 通过超声可以清晰看到子宫的大小、形态，有无子宫肌瘤、子宫内膜息肉等病变，还能观察卵巢的卵泡发育情况等。一般经腹部超声检查需要憋尿，经阴道超声检查则不需要憋尿，经阴道超声检查相对更清晰，不过未婚女性一般选择经腹部超声检查。性激素六项检查： 包括促卵泡生成素、促黄体生成素、雌二醇、孕酮、睾酮、泌乳素。通过检测这些激素水平，可以了解女性的内分泌功能是否正常，比如多囊卵巢综合征患者往往会出现性激素六项异常，如睾酮升高、促黄体生成素与促卵泡生成素比值异常等。
男性方面检查
精液常规检查： 这是评估男性生育能力的重要检查。一般需要男性禁欲2~7天，然后通过手淫的方式采集精液。通过精液常规检查可以了解精子的数量、活力、形态等情况。正常精液量应在2~6毫升，精子密度应大于1500万/毫升，精子活力a级（快速前向运动）应大于25%，或a+b级（前向运动）大于50%等。生殖系统超声检查： 可以检查男性的睾丸、附睾、精索等情况，看是否有睾丸发育不良、附睾炎、精索静脉曲张等问题。精索静脉曲张可能会影响精子的质量和数量，从而影响受孕，超声检查能发现精索内静脉是否扩张等情况。
其他相关检查
双方染色体检查： 如果夫妻多次备孕失败，还可以考虑进行染色体检查。染色体异常可能会导致不孕不育等问题，比如平衡易位等染色体结构异常可能影响胚胎的正常发育。染色体检查一般需要抽取静脉血，费用相对较高，大概1000~2000元左右。免疫因素检查： 有些女性体内存在抗精子抗体、抗子宫内膜抗体等免疫抗体，也会影响受孕。需要进行相关的免疫指标检测，如抗精子抗体检测等，费用因检测项目而异，一般在几百元不等。