佝偻病的诊断通常需要结合临床表现、血液检查和骨骼X线检查等多方面来进行。一般来说，医生会从多个维度综合判断是否患有佝偻病。
临床表现观察
症状表现： 6个月以内的婴儿可能会出现颅骨软化，用手指轻压枕骨或顶骨中央，该处会有颅骨内陷，随手指放松而弹回的现象；8 - 9个月以上的婴儿可能有方颅，即额骨、顶骨双侧骨样组织增生呈对称性隆起；1岁左右的孩子可能出现胸廓畸形，如肋骨串珠、鸡胸、漏斗胸等；会走路的孩子还可能出现下肢畸形，如O型腿或X型腿等。体征检查： 医生会检查患儿的骨骼形态，观察有无上述典型的骨骼改变，同时还会检查患儿的肌张力、神经反射等情况，因为佝偻病可能会影响肌肉和神经功能。
血液检查辅助
血钙、血磷检测： 血钙浓度一般正常或稍低，血磷浓度则明显降低。正常情况下，儿童血钙参考值约为2.25 - 2.58mmol/L，血磷参考值约为1.1 - 1.3mmol/L，佝偻病患儿血磷往往低于1.1mmol/L。碱性磷酸酶测定： 血清碱性磷酸酶活性显著升高，这是因为佝偻病时成骨细胞活性增加，碱性磷酸酶释放增多。正常儿童血清碱性磷酸酶（磷酸对硝基苯酚速率法）参考值为20 - 60U/L，佝偻病患儿该指标会明显高于此范围。25 - 羟基维生素D测定： 血清25 - 羟基维生素D水平是反映机体维生素D营养状况的敏感指标，维生素D缺乏性佝偻病患儿血清25 - 羟基维生素D常低于20ng/ml。
骨骼X线检查
长骨骨骺端改变： X线检查可见长骨骨骺端钙化带消失，呈毛刷样、杯口状改变；骨骺软骨盘增宽，一般可达2mm以上；骨质稀疏，骨皮质变薄；可有骨干弯曲畸形或骨折等。例如，对于腕部X线片，正常儿童的骨骺线清晰，而佝偻病患儿的骨骺线会增宽，钙化带不明显，呈现出典型的佝偻病X线表现。通过骨骼X线检查可以直观地看到骨骼的发育情况，对佝偻病的诊断具有重要价值。