试管婴儿二代和三代的主要区别在于受精方式和适用情况不同。
试管婴儿二代，即卵胞浆内单精子显微注射技术，是在体外受精-胚胎移植（IVF-ET）基础上发展起来的显微受精技术，通过直接将精子注射入卵母细胞胞浆内，来达到助孕目的，主要适用于男性因素导致的不育，如严重的少、弱、畸精子症，不可逆的梗阻性无精子症，生精功能障碍（排除遗传缺陷疾病所致），免疫性不育，常规体外受精失败，精子顶体异常等。
试管婴儿三代，即胚胎植入前遗传学检测技术，是指在试管婴儿胚胎移植前，取胚胎的遗传物质进行分析，诊断是否有异常，筛选健康胚胎移植，防止遗传病传递的方法，主要适用于有染色体疾病的夫妇和一些特殊情况，如高龄（年龄≥35岁）、反复自然流产、反复种植失败、男方严重少弱畸形精子症、梗阻性无精子症、生精功能障碍、三代试管婴儿技术助孕2次及以上失败、不明原因的不孕症等。
需要注意的是，试管婴儿技术是一种复杂的生殖技术，需要在专业医生的指导下进行。在选择试管婴儿技术时，夫妇应该充分了解不同技术的特点和适用情况，并根据自己的实际情况进行选择。同时，夫妇也应该注意心理调节，保持良好的心态，积极配合医生的治疗。