维生素B族最佳服用时间需分情况讨论。
一、正常人群日常补充
正常人群日常补充维生素B族，一般可在饭后服用。因为饭后胃肠道有食物，能减少药物对胃黏膜的刺激，同时有助于维生素B族更好地被吸收利用。例如，吃饭时或饭后立即服用，可随着食物消化进程同步促进其吸收。
二、特定人群有特殊情况
对于一些胃肠功能较弱的人群，如患有慢性胃炎等疾病的人，更建议在饭后半小时左右服用维生素B族，这样能进一步减轻对胃肠的刺激，又能保证吸收。而对于因工作忙碌可能饮食不规律、容易缺乏维生素B族的人群，可固定在每天同一时间段饭后服用，保持规律补充。
三、与药物同服需注意时间间隔
如果正在服用其他药物，服用维生素B族时需注意与其他药物的服用时间间隔开。一般间隔1 - 2小时，避免药物之间相互作用影响吸收或产生不良反应。比如服用抗生素类药物后，最好间隔一段时间再服用维生素B族。
四、特殊职业人群
像长期从事高温环境工作、大量出汗的人群，由于维生素B族随汗液流失较多，可在当天出汗较多的劳动前后适当补充维生素B族，具体时间可根据出汗情况灵活调整，但一般也建议饭后服用，以利于吸收来补充流失的部分。