肥厚型梗阻性心肌病的诊断通常需要结合多种检查手段。首先，超声心动图是常用的重要检查方法，约90%以上的患者通过超声心动图可发现室间隔非对称性肥厚，室间隔厚度与左心室后壁厚度之比≥1.3是重要的诊断指标之一。
心电图检查方面
心电图表现： 约60%的患者心电图可出现左心室肥大伴ST-T改变，表现为ST段压低，T波倒置，有时可出现异常Q波，这种异常Q波主要出现在I、aVL或Ⅱ、Ⅲ、aVF、V4、V5导联，需注意与心肌梗死的Q波相鉴别。特殊心电图情况： 部分患者可能出现房室传导阻滞或室性心律失常的心电图表现，如室性早搏等。
心脏磁共振成像检查
成像特点： 心脏磁共振成像（CMR）对肥厚型梗阻性心肌病的诊断具有较高价值，它可以更准确地评估心肌肥厚的部位、程度以及心肌的纤维化情况等。通过CMR检查，能清晰显示室间隔增厚的具体范围和程度，还可发现心肌内有无纤维化区域，一般来说，心肌纤维化区域在CMR上有特定的信号表现。诊断优势： 相较于其他检查方法，CMR在评估心肌肥厚的空间分布和心肌组织特征方面更为精准，有助于更全面地了解病情。
心导管检查
压力测定情况： 心导管检查可发现左心室流出道压力阶差，一般静息时压力阶差≥30mmHg具有诊断意义。在进行心导管检查时，将导管插入左心室，可测量左心室与主动脉之间的压力差，若压力阶差达到上述标准，结合其他临床表现和检查，可辅助诊断肥厚型梗阻性心肌病。诱发压力阶差： 部分患者在做Valsalva动作或使用正性肌力药物（如异丙肾上腺素）时，左心室流出道压力阶差可明显增大，这也是诊断的重要依据之一。