睾丸炎通常由细菌和病毒感染引起，其中附睾炎常伴发睾丸炎。一般来说，急性细菌性睾丸炎多由泌尿系统感染的细菌经淋巴或输精管扩散至附睾睾丸所致，常见的致病菌有大肠杆菌、变形杆菌、葡萄球菌及绿脓杆菌等。而病毒性睾丸炎中，流行性腮腺炎是最常见的病因，多见于青春期后期的男性，据统计，约20%的腮腺炎患者会并发睾丸炎。
感染因素导致
细菌感染：像大肠杆菌、葡萄球菌等细菌，可能通过尿道逆行感染，进入输精管、附睾等部位引发炎症。比如，不注意个人卫生，导致细菌从尿道口侵入，就有可能一步步感染到睾丸。病毒感染：最典型的是流行性腮腺炎病毒，它会通过血液循环侵犯睾丸。通常在患腮腺炎后2 - 3周左右，可能出现睾丸肿大疼痛等睾丸炎症状。
非感染因素相关
创伤：阴囊受到直接的外伤，比如撞击、骑跨伤等，会引起睾丸组织损伤，从而诱发炎症。例如运动时意外碰撞到阴囊，就可能导致睾丸受伤发炎。自身免疫性疾病：身体的免疫系统错误地攻击自身组织，当攻击睾丸组织时，也会引发睾丸炎。这类情况相对较少见，但也是导致睾丸炎的一个原因。
其他诱发情况
导管梗阻：如果睾丸的导管发生梗阻，会导致分泌物积聚，刺激睾丸组织，引发炎症反应。这可能是先天性的导管发育异常，也可能是后天导管被堵塞等原因造成。长期留置导尿管：长期留置导尿管的患者，尿道内的细菌容易沿着导尿管上行感染，进而波及睾丸，引发睾丸炎。一般长期留置导尿管超过1周的患者，发生睾丸炎的风险会增加。