腰穿术的操作过程如下：
1.患者侧卧于硬板床上，背部与床面垂直，头向前胸部屈曲，两手抱膝紧贴腹部，使躯干呈弓形。或由助手立于术者对面，用一手搂住患者头部，另一手搂住双下肢胭窝处并用力抱紧，使脊柱尽量后凸以增宽椎间隙，便于进针。
2.确定穿刺点：通常以双侧髂嵴最高点连线与后正中线的交点为穿刺点，此处相当于第3～4腰椎棘突间隙，有时也可在上一或下一腰椎间隙进行。
3.常规消毒皮肤：以穿刺点为中心进行消毒，直径约15厘米。
4.局部麻醉：用2%利多卡因自皮肤至椎间韧带作局部浸润麻醉。
5.穿刺：术者用左手固定穿刺点皮肤，右手持穿刺针以垂直背部的方向缓慢刺入，针尖稍斜向头部，成人进针深度约为4～6厘米，儿童则为2～4厘米。当针头穿过韧带与硬脑膜时，可感到阻力突然消失并有落空感。此时可将针芯慢慢抽出，见脑脊液流出。
6.测压与取材：接上测压管，测量脑脊液压，并嘱患者放松，然后快速收集脑脊液2～5毫升送检。如需做培养时，应用无菌操作法留取标本。
7.拔针：缓慢拔出穿刺针，覆盖消毒纱布，用胶布固定。
8.术后处理：术后去枕平卧4～6小时，以免引起术后低颅压头痛。
腰穿术是一种有创操作，需要在医生的指导下进行。在操作过程中，患者可能会感到轻微的疼痛和不适，但通常是可以忍受的。如果患者在操作过程中出现头痛、恶心、呕吐等不适症状，应及时告知医生。