当怀疑存在先天性巨结肠时，为明确诊断以及知晓病变部位与范围，需进行腹部X线检查、钡灌肠、直肠测压、活体组织检查、直肠黏膜组织化学检查等操作。具体如下：
一、腹部X线检查：能够看到扩张充气的结肠影，或者呈现出结肠梗阻的表现。
二、钡灌肠：通过少量钡剂灌肠，可以了解痉挛段的长度以及排钡功能；若钡剂在24小时后仍有残留，这是巨结肠的有力佐证。
三、直肠测压：这是检查先天性巨结肠的有效方式，主要是为了了解肛管有无正常的松弛反射。
四、活体组织检查：对黏膜下及肌层进行病理检查，从而确定是否存在神经节细胞。
五、直肠黏膜组织化学检查：在直肠黏膜下固有层进行组化染色可发现乙酰胆碱酯酶呈现强阳性染色；存在大量染色的神经纤维，而缺乏神经节细胞。
总之，这些检查对于先天性巨结肠的诊断和评估具有重要意义。