一、样本采集
染色体核型分析的样本来源多样，常见有外周血、骨髓、羊水、绒毛等。外周血采集需无菌操作采集静脉血，成人一般采集5-10ml，儿童根据体重等调整采集量；羊水采集需在超声引导下进行，孕周通常为16-22周，避免损伤胎儿；骨髓采集适用于血液系统疾病等情况，由专业医生在无菌操作下进行；绒毛采集孕周较早，一般在孕10-13周，需谨慎操作以降低流产等风险。
二、细胞培养
外周血样本：加入植物血凝素（PHA）刺激淋巴细胞转化为淋巴母细胞，使其进入有丝分裂周期，培养环境需保持37℃恒温、合适的二氧化碳浓度及无菌条件，培养基一般采用含血清的专用细胞培养基。
骨髓样本：骨髓中的造血干细胞等需特定刺激因素促进其增殖分裂，培养条件类似外周血培养，但可能因细胞特性不同调整培养基成分。
羊水样本：羊水中的胎儿脱落细胞需合适的培养体系，提供营养物质等促进细胞生长分裂。
绒毛样本：绒毛组织中的细胞培养需注意维持细胞活性，选择适宜的培养条件促使细胞进入分裂期。
三、制片
1.低渗处理：培养后的细胞用低渗溶液（如0.075mol/L氯化钾溶液）处理，使细胞膨胀，染色体铺展，一般处理时间为15-30分钟，需根据细胞类型调整时间。
2.固定：采用固定液（如甲醇-冰醋酸混合液）固定细胞，固定多次以确保细胞形态稳定。
3.滴片：将固定好的细胞悬液滴在洁净载玻片上，通过控制滴片高度等使染色体分散良好。
四、显带技术
1.G显带（Giemsa显带）：用胰酶消化染色体标本片后，再用Giemsa染色，可显示出明暗相间的带纹，能清晰分辨染色体的特征带，是最常用的显带方法，带纹分辨率较高。
2.Q显带（荧光显带）：用荧光染料（如芥子喹吖因）染色，在荧光显微镜下观察，染色体显示出不同荧光强度的带纹，但该方法保存时间较短。
3.R显带（反带）：与G显带带纹相反，显示的带纹特征不同，常用于某些染色体异常的辅助诊断。
五、显微镜观察与核型分析
将制备好的染色体标本片置于光学显微镜下，观察染色体的形态、数目、结构等。然后按照人类细胞遗传学国际命名体制（ISCN）的标准，对染色体进行配对、排列，分析是否存在染色体数目异常（如多倍体、单体等）或结构异常（如缺失、重复、易位、倒位等）。对于不同年龄、性别等人群，核型分析时需考虑正常人群的染色体核型范围，如正常男性核型为46,XY，正常女性为46,XX，若检测结果偏离正常范围则提示可能存在染色体相关疾病。对于孕妇羊水样本的核型分析，需特别关注胎儿染色体是否正常，以评估胎儿健康状况；儿童样本分析时要结合儿童正常生长发育阶段的染色体特征，排查是否存在影响儿童生长发育的染色体异常情况。