一代头孢、二代头孢、三代头孢的区别主要体现在以下几个方面：
1.抗菌谱：一代头孢对革兰氏阳性菌（如链球菌、肺炎球菌等）的抗菌作用较强，对革兰氏阴性菌（如大肠埃希菌、克雷伯菌等）的抗菌作用较弱；二代头孢对革兰氏阳性菌的抗菌作用与一代头孢相似，对革兰氏阴性菌的抗菌作用有所增强；三代头孢对革兰氏阳性菌的抗菌作用较弱，对革兰氏阴性菌（包括铜绿假单胞菌、厌氧菌等）的抗菌作用较强。
2.肾毒性：一代头孢中，头孢噻啶的肾毒性较大，其他品种的肾毒性较小；二代头孢中，头孢呋辛的肾毒性较小，其他品种的肾毒性与一代头孢相似；三代头孢的肾毒性较小，基本无肾毒性。
3.对β-内酰胺酶的稳定性：一代头孢对β-内酰胺酶的稳定性较差，容易被β-内酰胺酶水解；二代头孢对β-内酰胺酶的稳定性有所增强；三代头孢对β-内酰胺酶的稳定性最强，不易被β-内酰胺酶水解。
4.临床应用：一代头孢主要用于治疗敏感菌引起的呼吸道、泌尿道、皮肤软组织等感染；二代头孢可用于治疗敏感菌引起的呼吸道、泌尿道、胆道、皮肤软组织等感染，也可用于治疗败血症、脑膜炎等严重感染；三代头孢主要用于治疗敏感菌引起的败血症、脑膜炎、肺炎、腹膜炎等严重感染，也可用于治疗尿路感染、胆道感染等。
需要注意的是，头孢菌素类药物属于处方药，应在医生的指导下使用。在使用过程中，应注意过敏反应、肾毒性等不良反应的发生，如有异常应及时就医。同时，头孢菌素类药物与其他药物可能会发生相互作用，如与氨基糖苷类药物、利尿剂等合用时，可能会增强肾毒性，应避免同时使用。