强直性脊柱炎的确诊通常需要结合临床表现、影像学检查和实验室检查等多方面来综合判断。一般来说，医生会从多个维度进行评估来确诊该病。
临床表现评估
症状表现： 患者常常会出现下腰背部疼痛，这种疼痛通常在夜间或休息时加重，活动后缓解，病程可能会超过3个月。部分患者还可能伴有晨僵，晨僵时间一般超过30分钟。另外，患者可能出现外周关节受累，比如髋关节、膝关节等部位疼痛、肿胀。家族史参考： 强直性脊柱炎有一定的遗传倾向，如果家族中有亲属患有强直性脊柱炎，那么个体患病的风险会相对增高。
影像学检查
X线检查： 早期可能无明显异常，随着病情进展，会出现骶髂关节骨质破坏、间隙狭窄等改变，后期可出现脊柱竹节样改变。一般在发病数月至数年后X线才会有较为明显的表现。CT检查： 对于骶髂关节病变的诊断比X线更敏感，能够更早发现骶髂关节的细微变化，如软骨下骨板的侵蚀、硬化等。
实验室检查
HLA - B27检测： 大约90%的强直性脊柱炎患者HLA - B27呈阳性，但HLA - B27阳性并不一定就确诊为强直性脊柱炎，因为正常人群中也有一定比例的HLA - B27阳性者。不过HLA - B27阳性对强直性脊柱炎的诊断有一定的辅助价值。炎症指标检测： 血沉（ESR）和C -反应蛋白（CRP）等炎症指标可能会升高，提示体内存在炎症反应，但这些指标升高也可见于其他炎症性疾病，并非特异性指标。