一、来源差异
1.维生素D1：实际是麦角固醇经光能作用形成的前维生素D3与速甾醇的混合物，因稳定性差且已少用；2.维生素D2：主要源于植物，由植物中的麦角固醇经紫外线照射转化生成；3.维生素D3：主要由人体皮肤内的7-脱氢胆固醇经紫外线照射转化而来，也可从动物性食物（如油性鱼类、蛋黄、动物肝脏等）中获取。
二、结构区别
维生素D2化学名为麦角钙化醇，维生素D3化学名为胆钙化醇，二者结构存在细微差异，主要是侧链部分不同。
三、生物学活性差异
1.代谢转化：体内维生素D2需经肝脏和肾脏两次羟化生成1,25-二羟维生素D₂发挥作用；维生素D3需经肝脏和肾脏两次羟化生成1,25-二羟维生素D₃发挥作用。2.活性强弱：维生素D₃的生物学活性相对更强，因人体自身可合成维生素D₃，而维生素D₂主要依赖外源补充。
四、食物来源区别
1.维生素D2：常见于真菌、酵母等植物性食物中；2.维生素D3：多见于油性鱼类、蛋黄、动物肝脏等动物性食物中。
五、特殊人群注意事项
1.儿童：皮肤合成维生素D₃能力随年龄增长逐渐完善，婴幼儿可通过适度日照促进维生素D₃合成，素食儿童需关注维生素D₂的食物摄入来源；2.老年人：皮肤合成维生素D₃能力下降，需保证从食物或补充剂中获取足够的维生素D₃；3.特殊饮食人群：严格素食者因缺乏动物性食物来源，需更关注维生素D₂的补充途径及摄入量，确保满足机体需求。